共創(chuàng)共贏
黃曲霉毒素是毒素較強的一類生物毒素，也是強致癌物。它是由黃曲霉菌和寄生曲霉菌等多種真菌產生的一類代謝產物，為常見的有B1、B2、G1、G2、M1，其中 B1的存在量與毒性都是大的。作為一種天然生物毒素，其廣泛存在于糧油食品中，其中以花生、 玉米和大米的污染為嚴重。
八寶粥是一種由多種谷類和豆類混合的食品，作為中國的傳統(tǒng)食品，歷史悠久，目前關于八寶粥中黃曲霉毒素B1的檢測方法報道較少。
方法優(yōu)勢
迪馬科技開發(fā)的《八寶粥中黃曲霉毒素B1的測定-SPE-UPLC-MS/MS法》采用凈化柱ProElut AFT-3柱凈化樣品，本方案具有：
1) 前處理步驟簡單、回收率高、方法穩(wěn)定性好、凈化效果優(yōu)異等特點；
2) 避免了免疫親和柱容易受環(huán)境影響而引起黃曲霉毒素回收率低和凈化效果不好的弊端，保證了實驗結果的重現性和準確性；
3) 過柱方法簡單易操作，對操作人員要求不高，檢測成本相對較低；
4) 方法定量限0.1 μg/kg。
柱優(yōu)勢
1) ProElut AFT-3柱由2種吸附劑按照一定的比例分層填裝而成，采用不同作用機理去除雜質，同時對黃曲霉毒素沒有不可逆吸附，保證了樣品的凈化效果及回收率；
2) 本產品是商品化的成品柱，吸附劑穩(wěn)定性好，不受外界環(huán)境因素影響，保證實驗結果的重現性和準確性；
3) 過柱過程操作步驟簡單，節(jié)省時間，提高了工作效率。
以下為詳細解決方案，敬請參考！
八寶粥中黃曲霉毒素B1的測定SPE-UPLC-MS/MS法
1、適用范圍
本方法適用于八寶粥中黃曲霉毒素B1的檢測，定量限0.1 μg/kg。
2、標準品配制
單標標準儲備液：準確吸取一定量的20 μg/mL標準儲備液(甲ben：乙腈=98：2)，用乙腈配制成50 ng/mL和500 ng/mL的標準儲備液。
3、提取
取5 g八寶粥于50 mL離心管中，加入2 mL水、20 mL乙腈，振蕩20 min，加入2 g氯化鈉，振蕩2 min，6000 rpm離心2 min，取全部乙腈層，待凈化。
4、凈化
SPE柱： ProElut AFT-3 12 mL(Cat#: 65915)
(1)上樣：將待凈化液加入柱中，收集流出液；
(2)洗脫：加入5 mL乙腈，合并流出液;
(3)重新溶解：將流出液在40 ℃水浴下減壓蒸干，用初始流動相定容至1 mL，混勻，過0.22 μm PTFE濾膜，供LC-MS/MS分析。
注：同方法制備基質匹配標準溶液，此方法無需活化小柱。
5、色譜條件
UPLC-MS/MS條件：
5.1 UPLC 條件
色譜柱：Leapsil C18,100×2.1 mm,2.7 μm(Cat#:86005)
流速：0.3 mL/min 進樣量：10 μL 柱溫：40 ℃
流動相： A：0.1%甲酸水 B：乙腈
梯度設置：
Time（min） | 0 | 6 | 7 | 15 |
A（%） | 90 | 30 | 90 | 90 |
B（%） | 10 | 70 | 10 | 10 |
5.2 質譜條件
電離模式：ESI | 掃描方式：正離子掃描 |
檢測方式：多反應監(jiān)測 | 電噴霧電壓：5500 V |
霧化氣壓力：50 psi | 輔助氣壓力：50 psi |
氣簾氣壓力：20 psi | 離子源溫度：500 ℃ |
定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表
藥物名稱 | 定性離子對 | 定量離子對 | 碰撞氣能量/eV | 去簇電壓/V |
（m/z） | （m/z） | |||
(母離子/子離子) | (母離子/子離子) | |||
黃曲霉毒素B1 | 313.0/241.0 | 313.0/241.0 | 51 | 78 |
313.0/285.0 | 51 |
6、添加回收結果及色譜圖
八寶粥中黃曲霉毒素B1的LC-MS/MS檢測添加回收結果：
樣品 基質 | 回收率（%） | ||
添加水平：0.1 μg/kg | 添加水平：0.5 μg/kg | 添加水平：5 μg/kg | |
加標量：50 ng/mL，加10 μL | 加標量：50 ng/mL，加50 μL | 加標量：500 ng/mL，加50 μL | |
八寶粥 | 96.44 | 91.60 | 93.31 |
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R^2 = 0.9998 標準曲線濃度分別為：0.5 ng/mL、2.5 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、25 ng/mL
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R^2 = 0.9996 基質標準曲線濃度分別為：0.5 ng/mL、2.5 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、25 ng/mL
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7、相關產品信息
八寶粥中黃曲霉毒素B1的測定SPE-UPLC-MS/MS法相關產品信息：
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
樣品前處理 | ||
65915 | 黃曲霉毒素檢測固相萃取柱ProElut AFT-3 | 12 mL, 20/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2 L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
30043 | FitMax針頭式過濾器 PTFE | 13 mm, 0.22 μm 100/pk |
標準品 | ||
56-34029-2ML | 黃曲霉毒素B1 [1162-65-8] | 2 μg/mL溶于乙腈 2 mL |
色譜柱及保護柱 | ||
86005 | UPLC/HPLC兼容色譜柱 Leapsil C18 | 100 x 2.1 mm, 2.7 μm |
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 | ||
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
50144 | 甲酸 HPLC級 | 50 mL |
通用色譜產品 | ||
52401B | 瓶架/藍色（現貨） | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色（現貨） | 50孔 |
1034 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL, 100/pk |
1035 | 樣品瓶蓋/含墊（已經組裝） | 100/pk |
H80465 | HPLC 進樣針 | 25 μL |
